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Ehrlich蘇木素染色液
摘要
屬于常規(guī)切片HE染色的明礬蘇木素的一種,尤其適用于教學(xué)和科研上的核染色質(zhì)染色,也可用于黏蛋白染色(如軟骨的黏多糖),推薦用于骨和軟骨的染色。
產(chǎn)品介紹
Ehrlich蘇木素染色液
產(chǎn)品簡(jiǎn)介：
蘇木素
(Hematoxylin)和伊紅(Eosin)聯(lián)合染色簡(jiǎn)稱HE染色，是病理學(xué)和組織學(xué)很常用的一種染色方法。蘇木 精為堿性天 然染料，可使細(xì)胞核著色。細(xì)胞核內(nèi)染色質(zhì)的主要成分是DNA，在DNA的雙螺旋結(jié)構(gòu)中，兩條核苷酸鏈上的磷酸基向外，使DNA雙螺旋的外側(cè)帶負(fù)電荷，呈酸性，很容易與帶正電荷的蘇木 精堿性染料以離子鍵或氫鍵結(jié)合而被染色。蘇木素成熟的方法有自然氧化法、化學(xué)氧化法。自然氧化是指暴露于光和空氣中，這個(gè)過(guò)程比較緩慢，約需3～6個(gè)月不等，但生成物染色能力可維持很長(zhǎng)時(shí)間。Ehrlich和Delafield蘇木素就屬于這種。Ehrlich蘇木素作為一種良好的核染色液，也可用于黏蛋白染色如軟骨的黏液多糖，骨和軟骨的染色也推薦使用Ehrlich蘇木素染液。
Ehrlich蘇木素染液非常穩(wěn)定，成熟后密封可保存2年。對(duì)核染色質(zhì)染得很清晰細(xì)致，染色時(shí)間也稍長(zhǎng)，約15～20min。適用于教學(xué)和科研上的制片染色，用此染色液對(duì)冷凍切片染色則不理想。
染色原理：
細(xì)胞核染色的原理：
蘇木素為堿性天 然染料，可使細(xì)胞核著色。細(xì)胞核內(nèi)染色質(zhì)的成分主要是
DNA，在DNA雙螺旋結(jié)構(gòu)中，兩條核苷酸鏈上的磷酸基向外，使DNA雙螺旋的外側(cè)帶負(fù)電荷，呈酸性，很容易與帶正電荷的蘇木素堿性染料以離子鍵或氫鍵結(jié)合而被染色。蘇木素在堿性溶液中呈藍(lán)色，所以細(xì)胞核被染成藍(lán)色。
細(xì)胞漿染色的原理：
伊紅是一種化學(xué)合成的酸性染料，在一 定條件下可使細(xì)胞漿著色。細(xì)胞漿的主要成分是蛋白質(zhì)，為兩性化合物，細(xì)胞漿的染色與染液的
pH值密切相關(guān)。當(dāng)染色液pH值在胞漿蛋白質(zhì)等電點(diǎn)(4.7～5.0)以下時(shí)，胞漿蛋白質(zhì)以堿式電離，則細(xì)胞漿帶正電荷，就可被帶負(fù)電荷的酸性染料染色。伊紅在水中離解成帶負(fù)電荷的陰離子，與胞漿蛋白質(zhì)帶正電荷的陽(yáng)離子結(jié)合，使細(xì)胞漿著色，呈現(xiàn)紅色。
分化作用：
染色后，用某些特定的溶液將組織過(guò)多結(jié)合的染色劑脫去，這個(gè)過(guò)程稱為分化作用，所用的溶液稱為分化液。在
HE染色中常用1%鹽酸乙醇作為分化液，因酸能破壞蘇木素的醌型結(jié)構(gòu)，使組織與色素分離而退色。大多數(shù)組織經(jīng)蘇木素染色后，必須用1%鹽酸乙醇分化，使細(xì)胞核過(guò)多結(jié)合的蘇木素染料和細(xì)胞漿吸附的蘇木素染料脫去，再進(jìn)行伊紅染色，才能保證細(xì)胞核與細(xì)胞漿染色的分明。
返藍(lán)作用：
分化之后，蘇木素在酸性條件下處于紅色離子狀態(tài)，呈紅色；在堿性條件下處于藍(lán)色離子狀態(tài)，呈藍(lán)色。組織切片經(jīng)酸性乙醇分化后呈紅色或粉紅色，立即用水除去組織切片上的酸而中止分化，再用弱堿性水使蘇木素染上的細(xì)胞核呈現(xiàn)藍(lán)色，這個(gè)過(guò)程稱為返藍(lán)作用或藍(lán)化作用。另外用自來(lái)水浸洗也可使細(xì)胞核返藍(lán)，但所需時(shí)間較長(zhǎng)。
