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021-54845833/15800441009
產品簡介
產品名稱 ：小鼠骨髓造血干細胞
產品品牌 ：通蔚生物
組織來源 ：骨髓組織
產品規(guī)格 ：5×105cells/T 25細胞培養(yǎng)瓶
細胞簡介
小鼠骨髓造血干細胞分離自骨髓。骨髓是機體的造血組織，位于身體的許多骨骼內。成年動物的骨髓分兩種：紅骨髓和黃骨髓。紅骨髓能制造紅細胞、血小板和各種白細胞。血小板有止血作用，白細胞能殺滅與抑制各種病原體，包括細菌、病毒等。某些淋巴細胞能制造抗體。因此，骨髓不但是造血器官，它還是重要的免疫器官。
骨髓是存在于長骨（如肱骨、股骨）的骨髓腔和扁平骨（如髂骨）的稀松骨質間的網眼中，是一種海綿狀的組織，能產生血細胞的骨髓略呈紅色，稱為紅骨髓。出生時，紅骨髓充滿全身骨髓腔，隨著年齡增大，脂肪細胞增多，相當部分紅骨髓被黃骨髓取代，最后幾乎只有扁平骨骨髓腔中有紅骨髓。造血干細胞具有自我更新能力并能分化為各種血細胞的前提細胞，最終生成各種血細胞成分，包括紅細胞，白細胞和血小板。
造血干細胞需要根據(jù)機體的生理需求適時的補充血液系統(tǒng)各個成熟細胞組分。同時在損傷、炎癥等應激狀態(tài)下，造血干細胞也扮演著調節(jié)和維持體內血液系統(tǒng)各個細胞組分的生理平衡的角色。臨床治療中，造血干細胞移植廣泛應用于血液系統(tǒng)疾病以及自身免疫疾病，在其它實體瘤的治療中，比如淋巴瘤，生殖細胞瘤，乳腺癌，小細胞肺癌，主要應用于常規(guī)治療失敗或復發(fā)難治以及具有不良預后因素的患者。
造血干細胞以不對稱有絲分裂方式進行增殖，一個干細胞分裂產生兩個子細胞，一個分化為造血祖細胞，另一個則保持干細胞特征。造血干細胞在不斷體外培養(yǎng)產生大量造血祖細胞同時，保持自己既不增殖也不分化。體外培養(yǎng)微環(huán)境合適，造血干細胞可持續(xù)維持培養(yǎng) 60 天左右。 造血干細胞體外增殖培養(yǎng)需要基質細胞滋養(yǎng)（滋養(yǎng)層細胞）， 缺少滋養(yǎng)層細胞不增殖，無法長期培養(yǎng)，本產品為收集培養(yǎng)好的造血干懸浮細胞灌裝發(fā)貨，不包含滋養(yǎng)層，因此收貨后建議盡快實驗。
方法簡介
通蔚生物實驗室分離的小鼠骨髓造血干細胞采用沖洗骨髓、密度梯度離心、差速貼壁法結合培養(yǎng)基篩選制備而來，細胞總量約為5×105cells/瓶。
質量檢測
通蔚生物實驗室分離的小鼠骨髓造血干細胞經C D 34、Sca-1免疫熒光鑒定，純度可達90% 以上，且不含有H IV -1、H BV 、H C V 、支原體、細菌、酵母和真菌等。
培養(yǎng)信息
培 養(yǎng) 基 ：含F(xiàn)BS、生長添加劑、Penicillin、Streptom ycin等
換液頻率 ：每2-3天換液一次
生長特性 ：懸浮
細胞形態(tài) ：圓形
傳代特性 ：不建議傳代
消 化 液 ：0. 25% 胰蛋白酶
培養(yǎng)條件 ：氣相：空氣，95% 。C O2，5%
小鼠骨髓造血干細胞體外培養(yǎng)周期有限。建議使用通蔚生物配套的專用生長培養(yǎng)基及正確的操作方法來培養(yǎng)，以此保證該細胞的最佳培養(yǎng)狀態(tài)。
細胞培養(yǎng)狀態(tài)
發(fā)貨時發(fā)送細胞電子版照片
使用方法
小鼠骨髓造血干細胞是一種懸浮細胞，細胞形態(tài)呈圓形，在通蔚生物技術部標準操作流程下，細胞不建議傳代。建議您收到細胞后盡快進行相關實驗。
客戶收到細胞后，請按照以下方法進行操作。
1. 取出T 25細胞培養(yǎng)瓶，用75% 酒精消毒瓶身，拆下封口膜，放入37℃、5% C O 2、飽和濕度的細胞培養(yǎng)箱中靜置3-4h，以穩(wěn)定細胞狀態(tài)。
2. 懸浮細胞處理
1) 收集T25細胞培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基至50ml離心管中，用PBS清洗細胞培養(yǎng)瓶1-2次，收集清洗液。
2) 1200-1500rpm 離心3min，棄上清，收集細胞沉淀。
3) 加入5ml新鮮完全培養(yǎng)基，用吸管輕輕吹打混勻、分散細胞。將分散好的細胞調整合適
密度接種至培養(yǎng)器皿中，置于37℃、5% C O 2、飽和濕度的細胞培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng)。
4) 若遇到懸浮細胞團塊較大，無法機械吹散時，向步驟2) 中細胞沉淀添加0. 25% 胰蛋白酶消化液2m L至離心管中，用吸-管輕輕吹打混勻，37℃溫浴2-3min，消化結束后，加入胰酶抑制劑(或血清) 終止消化，用吸管輕輕吹打，分散細胞。1200rpm 離心5min，棄上清，收集細胞沉淀。
5) 加入5ml新鮮完全培養(yǎng)基，用吸管輕輕吹打混勻。按傳代比例進行接種傳代，然后補充
新鮮的完全培養(yǎng)基至5m L，置于37℃、5% C O 2、飽和濕度的細胞培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng)。
6)待細胞狀態(tài)穩(wěn)定后，培養(yǎng)觀察。之后按照換液頻率更換新鮮的完全培養(yǎng)基。
注意事項
1. 培養(yǎng)基于4℃條件下可保存3-6個月。
2. 在細胞培養(yǎng)過程中，請注意保持無菌操作。
3. 傳代培養(yǎng)過程中，胰酶消化時間不宜過長，否則會影響細胞貼壁及其生長狀態(tài)。
4. 建議客戶收到細胞后前3天每個倍數(shù)各拍幾張細胞照片，記錄細胞狀態(tài)，便于和通蔚生物技術部溝通。由于運輸?shù)脑?，個別敏感細胞會出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況，請及時和我們聯(lián)系，詳盡告知細胞的具體情況，以便我們的技術人員跟蹤、回訪直至問題得到解決。
特殊注意事項
5. 此細胞為懸浮細胞，請注意不要直接倒掉，造成損失。懸浮細胞因多數(shù)胞體較小，離心收集時，請注意懸液中細胞是否收集完全，可適當加大離心轉速200轉或增加離心時間3-5m in，增加細胞獲取量。為維持細胞干性，發(fā)貨細胞瓶內只灌裝1/3-1/2液體，請注意并非漏液。
