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  • WI38/VA13-SV-40Z轉(zhuǎn)化肺成纖維細(xì)胞

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WI38/VA13-SV-40Z轉(zhuǎn)化肺成纖維細(xì)胞
基本信息
產(chǎn)品品牌 : 通蔚生物
中文名稱 : SV -40Z 轉(zhuǎn)化肺成纖維細(xì)胞
細(xì)胞簡(jiǎn)稱 : W I38/V A 13
細(xì)胞形態(tài) : 上皮細(xì)胞樣
生長(zhǎng)特性 : 貼壁細(xì)胞
培養(yǎng)環(huán)境 : 空氣,95% ;CO2,5% 37℃
凍存條件 : 55% 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+40% FBS+5% DMSO 液氮
完全培養(yǎng)基 : MEM(含NEAA )(PM150410)+10% FBS(164210-50)+1%P/S(PB180120)

傳代步驟
1、吸出原培養(yǎng)液。
2、加入2ml左右PBS,輕輕晃動(dòng)培養(yǎng)瓶潤(rùn)洗細(xì)胞,吸出PBS丟棄。
3、加入1ml左右0.25% 胰蛋白酶溶液(含ED TA ),輕輕晃動(dòng)培養(yǎng)瓶使之浸潤(rùn)所有細(xì)胞。
4、放入培養(yǎng)箱消化,顯微鏡下看到細(xì)胞塊中間的細(xì)胞明顯變圓有間隙時(shí)可終止,全程不要拍打培養(yǎng)瓶。
5、加入3ml含血清的培養(yǎng)基終止消化,吹打細(xì)胞使之脫壁并在液體里反復(fù)吹打使細(xì)胞盡量呈單顆細(xì)胞的懸浮液。
6、收集細(xì)胞懸液離心,1200rpm /min 3分鐘,離心完吸出上清丟棄。
7、加入新鮮培養(yǎng)基,吹打幾下混勻細(xì)胞即可,按比例接種到新培養(yǎng)瓶,補(bǔ)足培養(yǎng)基,擰松瓶蓋或使用透氣瓶蓋進(jìn)行培養(yǎng)。
換液頻次 : 2~ 3次/周
傳代比例(密度) : 1:2-1:4

細(xì)胞背景描述
W I38/V A 13細(xì)胞是于1964年建系,源自3個(gè)月胎齡的女性胚胎的肺成纖維細(xì)胞,經(jīng)SV -40轉(zhuǎn)化。
供體年齡 : 女
組織來(lái)源 : 肺
細(xì)胞類(lèi)型 : 轉(zhuǎn)化細(xì)胞系
生物安全等級(jí) : 2
細(xì)胞保藏中心 : ATCC ; C C L-75.1ECACC ; 85062512

收到常溫細(xì)胞后如何處理
細(xì)胞培養(yǎng)詳細(xì)操作步驟請(qǐng)參照通蔚生物細(xì)胞培養(yǎng)操作指南
1. 收到常溫細(xì)胞后,及時(shí)拍照記錄有無(wú)漏液/瓶身破損現(xiàn)象。
2. 用75% 酒精擦拭細(xì)胞培養(yǎng)瓶表面,顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài)。先不要打開(kāi)培養(yǎng)瓶蓋,將細(xì)胞置于細(xì)胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng)2-4小時(shí),以便穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。
3. 仔細(xì)閱讀細(xì)胞說(shuō)明書(shū),了解細(xì)胞相關(guān)信息,如貼壁特性(貼壁/懸?。?、細(xì)胞形態(tài)、所用基礎(chǔ)培養(yǎng)基、血清比例、所需細(xì)胞因子、傳代比例、換液頻率等。
4. 靜置完成后,取出細(xì)胞培養(yǎng)瓶,鏡檢、拍照,記錄細(xì)胞狀態(tài)(所拍照片 將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù));建議細(xì)胞傳代培養(yǎng)后,定期拍照、記錄細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)。
5. 若觀察到異常或者對(duì)細(xì)胞有疑問(wèn),請(qǐng)及時(shí)跟我們聯(lián)系;對(duì)于細(xì)胞培養(yǎng)操作及培養(yǎng)注意事項(xiàng)有疑問(wèn)的,可跟我們的技術(shù)支持交流。

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