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    品質(zhì)保證 · 通蔚試劑

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    產(chǎn)品中心

    • 豬腺病毒PCR試劑盒

      規(guī)格：
      數(shù)量：

      購買數(shù)量

      • 品牌 : 通蔚生物
      • 目錄號(hào) : TW38091
      • 應(yīng)用 : 僅供科研使用
      • 保存條件 : 低溫/避光保存
      • 貨期 : 現(xiàn)貨
      • 商品庫存：100
    • 商品詳情
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    產(chǎn)品及特點(diǎn)：
    豬腺病毒(Porcine Adenovirus, Swine Adenovirus)會(huì)引起豬腺病毒感染，這是一種廣泛性、多型性的疾病，大多數(shù)是無癥狀的，有時(shí)也可引起腦炎、肺炎、腎損害或下痢等病癥，病毒的潛伏期約 4 天，主要表現(xiàn)為厭食、腸炎、共濟(jì)失調(diào)、肌肉震顫和呼吸道癥狀。仔豬腺病毒性腸炎主要表現(xiàn)為腹瀉，有時(shí)發(fā)生嘔吐，生長受阻，但不死亡。豬的腺病毒感染分布十分廣泛，可能通過糞經(jīng)口途徑傳播，該病毒會(huì)給養(yǎng)豬業(yè)造成嚴(yán)重?fù)p害，因此豬腺病毒的快速準(zhǔn)確鑒定對該病的預(yù)防和檢疫有著重要作用，為此本公司開發(fā)了簡單快捷的豬腺病毒PCR 檢測試劑盒。
    1. 即開即用，用戶只需要提供DNA模板。
    2. 引物經(jīng)過精心優(yōu)化，專一性強(qiáng)，只擴(kuò)增豬腺病毒，與其他病原沒有交叉反應(yīng)。
    3. 提供陽性對照，便于區(qū)分假陰性樣品。
    4. PCR mix 中含上樣染料，PCR后可以直接上樣電泳。
    5. 本試劑盒足夠做40μL體系的PCR 50次，但只能用于科研。
    規(guī)格及成分：

    編號(hào)

    成分

    規(guī)格

    試劑一

    PCR MagicMix 3.0

    1 mL（紅蓋）

    試劑二

    超純水

    1 mL（亮黃色）

    試劑三

    豬腺病毒PCR引物混合液

    100 μL（白蓋）

    試劑四

    豬腺病毒PCR 陽性對照（1×10E8 /μL）

    50 μL（黃蓋）

    試劑五

    使用手冊

    1 份

    運(yùn)輸及保存：
    低溫運(yùn)輸，-20℃保存，保存期限為一年。陽性對照需要單獨(dú)放置，不要污染其他試劑。
    自備試劑：
    樣品 DNA。
    使用方法：
    一、樣品 DNA 的制備：
    1. 用自選方法純化N+2個(gè)樣品的DNA，本試劑盒跟市場上大多數(shù)核酸提取試劑盒兼容?？梢赃x用本公司柱式病毒 DNAout。
    2. 如果有N個(gè)樣品，則需要做N+2個(gè)提取，包括一個(gè)樣品制備陽性對照和一個(gè)樣品制備陰性對照。樣品制備陽性對照是在適量水（取決于試劑盒要求的樣品起始量）中加 10μL 豬腺病毒 PCR 陽性對照的 1000 倍稀釋液而得，樣品制備陰性對照是直接用水。提取結(jié)束后最后得到模板 DNA 放冰上待用。
    二、設(shè)置 PCR 反應(yīng)(40μL 體系)：
    3. 對N+2個(gè)樣品，在PCR時(shí)需要增加一個(gè)PCR陽性對照和一個(gè)PCR陰性對照，故需要設(shè)置N+4個(gè)反應(yīng)。在N+4個(gè)PCR管中分別加入下列成分：

    成份

    N+2 個(gè)樣品管

    PCR 陰性對照

    PCR陽性對照

    PCR Magic Mix 3.0

    各 20μL

    20μL

    20μL

    豬腺病毒PCR 引物混合液

    各2μL

    2μL

    2μL

    N+2個(gè)樣品DNA模板

    各18μL

    --

    --

    PCR 陰性對照（水）

    --

    18μL

    --

    PCR 陽性對照（豬腺病毒)PCR陽性對照1000倍稀釋液）

    --

    --

    18μL

    4. 按下表設(shè)置 PCR 反應(yīng)：

    過程

    溫度

    時(shí)間

    逆轉(zhuǎn)錄

    42℃

    30 min

    預(yù)變性

    95℃

    5 min

    PCR反應(yīng)35個(gè)循環(huán)

    95℃

    30 sec

    58℃

    30 sec

    72℃

    20 sec

    最后延伸

    72℃

    7 min

    三、電泳檢測：
    5. 取 10-20 μL PCR 產(chǎn)物。電泳檢測 PCR 產(chǎn)物。本產(chǎn)品提供的 PCR Mix 在 擴(kuò)增結(jié)束后可以直接上樣，不需要另外再加 loading buffer。PCR 產(chǎn)物陽 性對照必須有 551bp 大小的條帶出現(xiàn)，陰性對照必須無任何擴(kuò)增，否則實(shí) 驗(yàn)無效。對沒有擴(kuò)增產(chǎn)物的樣品，可以稀釋 10 倍后重復(fù) PCR 擴(kuò)增以排除 PCR 抑制劑的感染。
    四、特別提示：
    本公司的所有產(chǎn)品，僅可用于科研實(shí)驗(yàn)，嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他非科研用途！
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