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【通蔚生物】:為您介紹γ-谷氨酰半胱氨酸連接酶(GCL)測(cè)試盒

發(fā)布時(shí)間:2023-12-29     發(fā)布作者:上海通蔚生物

通蔚生物γ-谷氨酰半胱氨酸連接酶(GCL)測(cè)試盒介紹如下:
γ-谷氨酰半胱氨酸連接酶(GCL)測(cè)試盒
中文名稱:γ-谷氨酰半胱氨酸連接酶(GCL)測(cè)試盒
測(cè)定方法:微量法
測(cè)定規(guī)格:100T/96S
保存條件:低溫避光保存
有 效 期:6個(gè)月
注    意:正式測(cè)定之前選擇2-3個(gè)預(yù)期差異大的樣本做預(yù)測(cè)定。
測(cè)定意義:
GCL 是 GSH 合成的限速酶,GSH 對(duì) GCL 有反饋抑制作用。GCL基因表達(dá)受多種因素調(diào)節(jié),如氧化劑、抗氧化劑、生長(zhǎng)因子和炎癥因子等。GCL活性高低對(duì)GSH含量和GSH/GSSG比值有重要影響。
測(cè)定原理:
在ATP和Mg2+存在下,GCL催化谷氨酸和半胱氨酸合成γ-谷氨酰半胱氨酸;同時(shí)ATP去磷酸化產(chǎn)生無機(jī)磷分子,通過測(cè)定無機(jī)磷增加速率,即可計(jì)算出GCL活性。
自備儀器和用品:
冷凍離心機(jī)、水浴鍋、移液器、可見分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、微量玻璃比色皿/96孔板、濃硫酸和蒸餾水。
注意事項(xiàng):
1. 樣品處理等過程均需要在冰上進(jìn)行,且須在當(dāng)日測(cè)定酶活力,以免影響其活力。如果是勻漿液,避免反復(fù)凍融。

2. 所有試劑配制完后,除表明 4℃保存外,請(qǐng)于 1 天內(nèi)用完。
3. 實(shí)驗(yàn)過程請(qǐng)帶手套,試劑三中有強(qiáng)腐蝕性物質(zhì),注意不要濺到皮膚上或眼睛內(nèi)。
4. 測(cè)定吸光值時(shí)請(qǐng)于水浴后 10~40 分鐘內(nèi)測(cè)完。
5. 樣本測(cè)定前先取 1-2 個(gè)樣做預(yù)實(shí)驗(yàn),如吸光值太高,應(yīng)先用試劑一(或者生理鹽水)稀釋到適當(dāng)倍數(shù),使得吸光值在標(biāo)準(zhǔn)曲線范圍內(nèi),哺乳動(dòng)物組織和血液一般稀釋 3~5 倍。
6. 試劑三配制過程中,可能會(huì)產(chǎn)生黑色固體,其不影響結(jié)果,注意吸取時(shí)不要將黑色固體吸入。
7. γ-谷氨酰半胱氨酸連接酶(GCL)測(cè)試盒細(xì)胞中 GCL 活性測(cè)定時(shí),細(xì)胞數(shù)目須在 300 萬-500 萬之間,細(xì)胞中 GCL 的提取時(shí)可加試劑一(或生理鹽水)后研磨或超聲波處理,不能用細(xì)胞裂解液處理細(xì)胞。
上海通蔚生物一直致力于為廣大高校、科研院所和企事業(yè)單位提供的科研試劑和完善的技術(shù)服務(wù),滿足生物化學(xué)、分子生物學(xué)、細(xì)胞生物學(xué)、免疫學(xué)等生物科技實(shí)驗(yàn)需求。

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