細胞污染會對細胞后繼培養(yǎng)造成一定問題，了解細胞常見細胞污染問題，針對當前問題快速判斷是至關重要！為了讓大家區(qū)分細胞污染，通蔚針對細胞常見污染類型進行盤點。了解這些常見細胞污染類型，會后續(xù)培養(yǎng)細胞預防污染打下基礎。

  細胞培養(yǎng)中會出現(xiàn)哪些污染？

  細菌污染

  細菌污染形態(tài)大小在0.5~5μm，形狀呈現(xiàn)球狀或桿狀，形狀規(guī)則，分布不均勻；一般細胞污染后48-72小時增值爆發(fā)式增值；營養(yǎng)被消耗掉，細胞培養(yǎng)基變黃，呈渾濁，通過鏡 下觀察，有明顯的定向運動。

  處理方法：對于細胞輕度污染可用10X雙抗清洗處理，如果細胞較為真貴，可以嘗試離心收集細胞，用新鮮培養(yǎng)基重懸，并通過0.22μm的濾器過濾除菌，對于重度細胞污染建議消殺后棄掉。

  真菌污染

  酵母菌和霉菌是兩種常見真菌的形態(tài)。霉菌污染通常呈現(xiàn)為絮狀、絨毛狀或蛛網(wǎng)狀，而酵母菌污染則更像是分散的小顆?；虺蓤F的菌落；常見肉眼可見的菌落，真菌污染會導致培養(yǎng)基顏色發(fā)生各種變化，包括變黃、變綠、變黑、變紫等等；隨著時間的推移，真菌會逐漸擴散并污染整個培養(yǎng)體系。真菌會產(chǎn)生孢子，孢子具有很強的抗逆性和傳播性，容易污染其他細胞。

  處理辦法：真菌污染較難根除，不建議保留，建議消殺后丟棄；由于真菌污染難以清除，預防更為重要。

  支原體污染

  支原體是目前已知最小的原核生物，在光學顯微鏡下難以觀察，需要借助電子顯微鏡或特殊染色方法；感染支原體的細胞，在某一時間點碎片突然增多，還包括細胞生長變慢、形態(tài)改變（如細胞變圓、出現(xiàn)空泡）、培養(yǎng)基pH值變化不明顯等；氣溶膠傳播是支原體污染的主要途徑之一，操作過程中的交叉污染也比較常見，支原體污染會對細胞的生長、代謝和功能產(chǎn)生廣泛的影響，嚴重干擾實驗結(jié)果！

  鑒定方法：PCR法、顯色法、熒光染色法、培養(yǎng)法

  處理辦法：若細胞狀態(tài)尚可，添加支原體抑制劑培養(yǎng)2-3代可轉(zhuǎn)陰；若細胞狀態(tài)很差，建議消殺后丟棄。預防勝于治療。嚴格的無菌操作、定期檢測、使用支原體清除試劑預防性處理等措施都非常重要。

  黑膠蟲污染

  黑膠蟲無明確定義，在鏡下無法直接觀察到。主要表現(xiàn)為細胞狀態(tài)差、黑點多或碎片多，布朗運動。通過檢測發(fā)現(xiàn)主要為支原體污染，部分為未知增值不明顯支原體污染。

  處理辦法：通過各種檢測方法排除已知的污染，例如支原體、細菌和真菌。 如果確定是支原體污染，則應使用針對性的支原體清除試劑。如果排除了所有已知污染，仍然存在“黑膠蟲”現(xiàn)象，則可以嘗試使用一些廣譜的抗生素或抗真菌藥物，但效果難以保證；若細胞狀態(tài)很差，建議消殺后丟棄。

  嚴格的無菌操作、定期清潔和消毒、使用高質(zhì)量的培養(yǎng)基和血清等，都是減少“黑膠蟲”污染的關鍵

  上述為大家介紹細胞常見的污染及原因。通過了解上述細胞污染及處理方法，確保細胞培養(yǎng)實驗結(jié)果的可靠性。為了避免細胞污染，平時在細胞培養(yǎng)同時，預防最關鍵。