酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)(ELISA)是一種常用的血清學(xué)檢測(cè)方式。今天由小蔚為大家詳解酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)的工作原理及應(yīng)用。了解酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)(ELISA)如何檢測(cè)血清。
ELISA血清學(xué)檢測(cè)法通常在多孔微量板中進(jìn)行,這樣可以很方便進(jìn)行血清的稀釋和檢測(cè)。為了更好的理解ELISA工作原理,我們來(lái)仔細(xì)看看,在檢測(cè)時(shí)多孔板的其中的一個(gè)孔中發(fā)生什么。
在進(jìn)行檢測(cè)前,先用目標(biāo)抗原包被多孔板的每個(gè)孔(對(duì)于商業(yè)化的檢測(cè)),制造商會(huì)把這個(gè)步驟做好。
elisa檢測(cè)試劑盒
首先,在開(kāi)始檢測(cè)時(shí),我們會(huì)在測(cè)試孔中加入稀釋過(guò)的患者血清。如果病人血清中有相應(yīng)的
抗體,它們會(huì)與固定在孔底的抗原結(jié)合,只有抗原特異性抗體才會(huì)固定在孔中。
接著(用緩沖液)清洗這些孔,將所有未集合的抗體去除。然后,加入含有動(dòng)物抗體的溶液(這里的動(dòng)物抗體能夠抗人類的抗體)。這第二種抗體(動(dòng)物抗體)上共價(jià)結(jié)合了一個(gè)酶。再次清洗這些孔,這次是為了清除去未結(jié)合的酶標(biāo)記抗體。
最后,加入一種顯色溶液,這種溶液含有一種可以被酶催化顯色的底物。底物與第二種抗體上的酶相互作用??梢允谷芤撼尸F(xiàn)明顯的顏色??梢酝ㄟ^(guò)肉眼觀察或儀器定量讀取每個(gè)孔中特定抗體的顯示結(jié)果。
隨著血清不斷稀釋,和抗原結(jié)合的抗體量就會(huì)減少,反應(yīng)的顏色也會(huì)越來(lái)越淡,能出現(xiàn)顯色反應(yīng)的最高稀釋倍數(shù)就是所測(cè)樣品的特價(jià)。
上文是上海通蔚為大家介紹酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)(ELISA)檢測(cè)血清的原理及應(yīng)用,您對(duì)血清檢測(cè)原理了解多少呢?在進(jìn)行酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)過(guò)程要遵循說(shuō)明書(shū)和注意事項(xiàng),確保實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性。