酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗

放射免疫分析

基本原理

使用與抗體相關(guān)的酶。

檢測基于酶-底物反應(yīng)的顏色變化或光發(fā)射。

使用放射性同位素標(biāo)記抗原。

檢測是基于測量抗原抗體復(fù)合物發(fā)射的放射性。

檢測機(jī)制安全

產(chǎn)生可測量的顏色變化或光發(fā)射。

測量放射性同位素發(fā)射的放射性。

安全

安全、無輻射危害。

無需特殊處理或處置要求。

涉及輻射危害。

需要小心處理、儲存和處置放射性物質(zhì)。

潛在的輻射危害需要記錄并報告。

實(shí)驗室要求

可以在標(biāo)準(zhǔn)實(shí)驗室進(jìn)行。

不需要專門的設(shè)施或培訓(xùn)。

需要專門的實(shí)驗室設(shè)施來處理放射性物質(zhì)。

需要專門的區(qū)域和對人員進(jìn)行專門的培訓(xùn)。

成本和便利性

一般成本較低。

沒有針對材料儲存或處理的具體安排。

由于使用放射性同位素而導(dǎo)致成本較高。

需要對放射性物質(zhì)的處理、儲存和處置進(jìn)行細(xì)致的規(guī)劃。

敏感度

靈敏度高，但一般比RIA靈敏度低。

比 ELISA 更靈敏。

監(jiān)管和安全問題

除了標(biāo)準(zhǔn)實(shí)驗室安全之外，沒有特定的監(jiān)管問題。

由于使用放射性物質(zhì)而產(chǎn)生嚴(yán)格的監(jiān)管和安全問題。

同位素的半衰期較短，限制了它的應(yīng)用。

酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗

熒光免疫分析

基本原理

使用酶聯(lián)抗體。

檢測基于酶-底物反應(yīng)的顏色變化或光發(fā)射。

使用附著于抗體的熒光標(biāo)簽。

檢測基于對抗原抗體復(fù)合物發(fā)出的熒光強(qiáng)度的測量。

檢測機(jī)制

測量顏色變化或光發(fā)射。

測量熒光強(qiáng)度。

敏感度

靈敏度高，但對于極低濃度，靈敏度一般低于熒光免疫分析法。

靈敏度高，適合檢測低濃度的抗原。

應(yīng)用

廣泛應(yīng)用于臨床診斷和研究。

適用于檢測和量化各種生物液體和組織中的抗原。

適用于需要高靈敏度的應(yīng)用。

常用于測量低抗原濃度的研究。

易于使用

使用微孔板讀數(shù)儀等標(biāo)準(zhǔn)實(shí)驗室設(shè)備進(jìn)行設(shè)置更加簡單。

需要能夠檢測熒光的設(shè)備。

酶聯(lián)免疫吸附試驗

化學(xué)發(fā)光免疫分析

基本原理

使用酶聯(lián)抗體。

檢測基于酶-底物反應(yīng)的顏色變化或光發(fā)射。

使用從激發(fā)態(tài)返回基態(tài)時發(fā)光的分子。

堿性磷酸酶或辣根過氧化物酶等酶催化與底物（例如魯米諾）的反應(yīng)，產(chǎn)生光。

檢測機(jī)制

測量顏色變化或光發(fā)射。

測量光發(fā)射。

敏感性和特異性

敏感性和特異性較高，但一般低于CLIA。

與 ELISA 相比，靈敏度和特異性更高。

在檢測 SARS-CoV-2 等疾病的抗體時顯示出更高的靈敏度（92.3% 到 97.8% 對比 ELISA 的 75.0% 到 84.3%）。

應(yīng)用

用于檢測和定量各種疾病的抗原和抗體，如 SARS-CoV-2、HIV、HCV、HBV、肺炎支原體、丙型肝炎病毒、梅毒螺旋體等。

易于使用

提供快速的結(jié)果。

需要專門的設(shè)備來測量光發(fā)射。

使用微孔板讀數(shù)儀等標(biāo)準(zhǔn)實(shí)驗室設(shè)備進(jìn)行設(shè)置更加簡單。

與 CLIA 相比更耗時。

成本效益

更具成本效益，適合日常使用。

由于需要專門的設(shè)備和試劑，因此通常價格更昂貴。

檢測范圍

測量光密度，其范圍可能更加有限。

測量相對光單位，提供更廣泛的檢測范圍。

酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗

蛋白質(zhì)印跡法

基本原理

使用光密度測量抗原抗體反應(yīng)。

由于其簡單性、速度和適合高通量實(shí)驗室而受到青睞。

使用96孔板，所需樣品量較少。

使用標(biāo)準(zhǔn)曲線量化抗原濃度。

更加復(fù)雜，更加耗時。

  需要仔細(xì)加載樣品，考慮膜和信號飽和度，并使用內(nèi)部控制進(jìn)行標(biāo)準(zhǔn)化。

  具有高特異性并能檢測蛋白質(zhì)的大小和純度。

  能夠利用熒光標(biāo)記抗體進(jìn)行多重檢測。

易于使用

操作簡單，適合大規(guī)模測試。

復(fù)雜且需要更多時間和專業(yè)知識。

涉及電泳、轉(zhuǎn)移到膜和抗體檢測等多個步驟。

敏感性和特異性

對檢測和定量抗原具有高靈敏度和良好的特異性。

特異性高，能夠確認(rèn)特定蛋白質(zhì)的存在和純度。

可以檢測蛋白質(zhì)的大小，提供有關(guān)目標(biāo)的額外信息。

應(yīng)用

廣泛應(yīng)用于臨床診斷和研究。

非常適合高通量篩選和常規(guī)檢測。

在需要詳細(xì)蛋白質(zhì)分析的研究和臨床環(huán)境中非常有價值。

用于確認(rèn)特定目標(biāo)并分析蛋白質(zhì)的大小和純度。

檢測和量化

依賴于光密度測量。

使用標(biāo)準(zhǔn)曲線進(jìn)行精確的濃度測定。

可以實(shí)現(xiàn)蛋白質(zhì)帶的可視化，提供有關(guān)蛋白質(zhì)大小的信息。

可以使用內(nèi)部控制進(jìn)行標(biāo)準(zhǔn)化以確保結(jié)果的準(zhǔn)確性。