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ELISA試劑盒加樣不準(zhǔn)確?這幾個(gè)技巧幫你解決

發(fā)布時(shí)間:2025-01-16     發(fā)布作者:上海通蔚生物

  當(dāng)拿到ELISA試劑盒,在開始做實(shí)驗(yàn)之前,正確的加樣可以確保實(shí)驗(yàn)結(jié)果準(zhǔn)確性。在ELISA常規(guī)實(shí)驗(yàn)中,實(shí)驗(yàn)涉及加樣標(biāo)準(zhǔn)品/樣本、加酶結(jié)合物、加底物和終止反應(yīng)等。在進(jìn)行ELISA試劑盒加樣怎樣確保實(shí)驗(yàn)準(zhǔn)確性?

 

  正確加樣步驟

 

  在加樣中,一般使用的是微量加樣器(移液器,移液器)。按照試劑盒說明書,將規(guī)定量的液體加入酶標(biāo)板。在每次加入新液體組分前,需要更換新的吸頭,以免液體組分發(fā)生交叉污染。也可以用一次性的定量塑料管加樣。


 微量加樣器步驟


  部分加樣步驟需要需要使用稀釋后液體組分,如標(biāo)準(zhǔn)品(凍干粉形式),需要先用一定量的稀釋液(通常是試劑盒提供的復(fù)溶液或指定的緩沖液)復(fù)溶,使其溶解成一定濃度的儲(chǔ)備液。然后再將這個(gè)儲(chǔ)備液按照一定的倍比進(jìn)行稀釋,配制成一系列不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)品溶液,用于后續(xù)實(shí)驗(yàn)的上樣(即加到酶標(biāo)板的孔中)。

 

  需要將濃縮的抗體和酶結(jié)合物用合適的稀釋液稀釋成1×工作液(即可以直接使用的濃度),才能加到酶標(biāo)板的孔中。

 

  加抗體、酶結(jié)合物工作液和底物工作液時(shí),可用定量多道加液器,節(jié)省加樣時(shí)間和操作,更好的確??着c孔之間平行,減少因操作帶來的誤差。


微量加樣器

 

  在進(jìn)行ELISA試劑盒加樣中,一般需要進(jìn)行"45"加樣。即加樣槍的吸頭所在的直線應(yīng)當(dāng)與板條所在的直線呈45度角,吸頭貼著孔壁加入。

 

  在吸取樣品時(shí),槍頭不應(yīng)黏附多余的液體;加樣時(shí)不可90度向孔中滴加液體,這樣會(huì)導(dǎo)致液體殘留在吸頭上,導(dǎo)致加樣準(zhǔn)確性降低。

 

  吸頭所在的直線與板條所在直線所呈角度不要過小,過小會(huì)使殘留的液體殘留才酶標(biāo)板孔內(nèi),導(dǎo)致加樣準(zhǔn)確性降低。

 

  不要將吸頭深入孔底,深入孔底可能會(huì)壓彎吸頭,另一方面吸頭深入孔底會(huì)產(chǎn)生氣泡,導(dǎo)致加樣準(zhǔn)確性降低。

 

  上述是通蔚為大家介紹elisa試劑盒加樣怎么確保實(shí)驗(yàn)準(zhǔn)確性”相關(guān)問題解答。以上是加樣tips的全部內(nèi)容,你都明白嗎?如果還有不明白,歡迎前來咨詢我們了解更多ELISA實(shí)驗(yàn)操作方面技術(shù)。

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