什么是胎牛血清？（Fetal Bovine Serum, FBS）是一種取自牛胚胎的血清，常用于配置動物細(xì)胞的培養(yǎng)基，是一種性狀、外觀 淺黃色澄清、無溶血、無異物稍粘稠液體。在細(xì)胞培養(yǎng)實驗，它能提供必要的生長激素、脂質(zhì)和其他養(yǎng)分以供細(xì)胞生長。胎牛血清來自母牛在懷孕5-8月胎牛，采用心臟穿刺采血，取得的血液通過離心等方法，經(jīng)加工后就成了胎牛血清。

  胎牛血清生產(chǎn)工藝

  一個合格的胎牛血清往往來自良好的生產(chǎn)工藝。那么，胎牛血清生產(chǎn)工藝流程有哪些呢？

圖1（胎牛血清生產(chǎn)流程）

  胎牛血清主要步驟如下：

  胎牛血清的收集。采集的胎牛血清是在經(jīng)過政府批準(zhǔn)設(shè)施中采集，在獸醫(yī)監(jiān)督下對健康的母牛進行臨床檢查，然后用最嚴(yán)格的無菌采集技術(shù)。在采集過程，通過心臟穿刺從封閉系統(tǒng)中的過期胎兒中抽取血液，取得的血液通過離心等方法，經(jīng)加工后就成了胎牛血清。

  冷凍離心。采集的血液無菌包裝保存，冷藏，促進凝固，獲得高純度血清。然后可以通過在冰箱中離心分離透明的黃色血清。這會從凝固的血液中去除細(xì)胞成分和凝血因子。

  過濾除菌。血清通過過濾鏈過濾用于細(xì)胞培養(yǎng)（通常為0.1μm三重過濾）。消除潛在細(xì)菌污染的類似過程是必要的，但不能完全消除病毒。如果需要，可以通過輻射（伽馬射線）進一步對血清進行滅菌。

  分裝貼標(biāo)保存。接下來進行無菌包裝和貼標(biāo)，并將樣品冷凍直至實驗室使用。該過程減少了有助于細(xì)胞生長的生物活性成分的降解，并可能顯著影響胎牛血清的最終質(zhì)量。

  胎牛血清的主要成分

  血清是血液凝固后的液體部分，不含血細(xì)胞、纖維蛋白及凝集因子等，可用于各種常規(guī)的細(xì)胞培養(yǎng)。胎牛血清的主要成分是血清白蛋白，除此之外，胎牛血清含有細(xì)胞生長因子，胎牛血清也含有一些小分子物質(zhì)，如氨基酸、糖類、脂類及激素類物質(zhì)。

圖2（胎牛血清）

  胎牛血清主要功能

  FBS成分與細(xì)胞生長、增殖、成熟和分化之間的相互作用仍在研究中。在貼壁細(xì)胞中，例如用于培養(yǎng)肉生產(chǎn)的牛肌肉來源的衛(wèi)星細(xì)胞，細(xì)胞與培養(yǎng)皿的安全附著是早期細(xì)胞生長的重要因素。

  影響細(xì)胞粘附的FBS因子包括血清擴散因子，包括纖連蛋白和層粘連蛋白。白蛋白是血清中存在的非粘附蛋白之一，可激活粘附和擴散因子，并影響細(xì)胞粘附的程度，并且取決于非粘附蛋白的量。

  此外，胎牛血清在牲畜生長過程中產(chǎn)生的免疫球蛋白含量極低，生長因子含量高；因此，它可用于各種物種的細(xì)胞培養(yǎng)，因為抗體引起的免疫反應(yīng)被最小化。盡管其影響因生長的細(xì)胞類型而異，但血清中存在的生長因子在細(xì)胞生長和增殖中發(fā)揮著重要作用。此外，雖然在不添加單獨的生長因子的情況下將生長因子單獨添加到血清中的效果是明顯的，但是根據(jù)生長因子的類型和含量，效果可能不均勻。有效誘導(dǎo)細(xì)胞生長的胎牛血清因子包括生長因子和細(xì)胞因子。這些因素有時會影響分化，例如表皮生長因子、胰島素樣生長因子（IGF）和血小板源性生長因子。這種效應(yīng)可以縮短細(xì)胞培養(yǎng)周期，降低親代生產(chǎn)或?qū)嶒灧治龅某杀尽?/span>

  血清中酶和激素的組成根據(jù)動物的屠宰期而變化。這些血清混合物成分含有細(xì)胞增殖和維持所需的大部分因子；因此，建議根據(jù)細(xì)胞培養(yǎng)的目的適量使用。尚未成功地對每種成分的效果進行明確的研究。與成年動物全血的成分類似，血清中的多種營養(yǎng)素可以促進細(xì)胞生長。糖類或氨基酸可以支持細(xì)胞增殖和代謝所需的能量。胎牛血清中含有微量的維生素和礦物質(zhì)，甚至這些量也會影響細(xì)胞的生長。已經(jīng)進行了許多研究來確定維生素或礦物質(zhì)對各種類型細(xì)胞的粘附、增殖或分化的積極/消極影響。

  此外，激素因子和轉(zhuǎn)運蛋白（攜帶激素、礦物質(zhì)、微量元素和脂質(zhì)）是維持細(xì)胞培養(yǎng)過程中pH變化的必要成分，它們也會影響蛋白酶抑制。這些效應(yīng)對于維持細(xì)胞活力非常重要。

  胎牛血清使用要點

  合理正確的使用胎牛血清可以使胎牛血清在細(xì)胞培養(yǎng)中發(fā)揮理想效果。在使用胎牛血清一些要點要留意，主要是存儲和解凍。

  胎牛血清的存儲。胎牛血清需在-20度長期避光保存，因為低溫可以有效地延緩血清中生物活性物質(zhì)的降解和變性。注意：如果在4度保存，不應(yīng)超過一個月。在使用血清時候，避免反復(fù)凍融，注意分裝使用。

  正確解凍。胎牛血清解凍非常關(guān)鍵，可先在4度冰箱過夜解凍，這里推薦使用血清融化三步法：即將500ml血清在室溫下放置1.5h，20℃水浴25min，37℃ 水浴35min。

  好了，上述上海通蔚為大家介紹胎牛血清，從生產(chǎn)工藝到胎牛血清的成分及存儲。市面上出現(xiàn)各類的牛血清，比如胎牛、新生牛和小牛，其實三者區(qū)別不大，主要區(qū)分是根據(jù)年齡不同來命名。胎牛血清因胎牛在母體內(nèi)未接觸外界，免疫球蛋白含量應(yīng)該是極少的，血清比較純，培養(yǎng)細(xì)胞的效果較佳，其次是新生牛和小牛。具體根據(jù)自身的實驗要求進行選擇。